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病毒包裝——慢病毒包裝
發布時間:2018-06-30 11:39   發布人:管理員
濟南基美生物技術有限公司現攜手上海漢恒生物為山東客戶提供病毒包裝、細胞穩定株篩選、microRNA等研究服務。
 
漢恒生物科技(上海)有限公司是一家專門從事生物技術服務和產品銷售與研發的高科技企業,公司專注於為廣大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆轉錄病毒包裝、細胞穩定株篩選、siRNA設計和microRNA研究服務。 漢恒生物科技(上海)有限公司自成立之日起,就以“為客戶提供最優質的服務和品質卓越的產品”為宗旨,憑借國際先進的實驗設備和經驗豐富的實驗技術人員,獲得了中國頂級病毒包裝供應商的美譽,是全國唯一一家可以提供病毒現貨的公司。
 
特色產品及服務
 
1. 全國最大的腺病毒現貨庫
2. 優質的慢病毒載體現貨庫
3. 國內領先的腺病毒包裝及純化服務
4. 國內領先的的慢病毒包裝及純化服務
3. 自噬研究必備——自噬LC3雙標腺病毒
4. 自主研發的特效抗支原體藥物——SaveltTM 
5. 自主研發的高效轉染試劑—— LipoFiterTM
 
 
慢病毒包裝
 
慢病毒(Lentivirus)載體是以 HIV-1 (人類免疫缺陷1型病毒)為基礎發展起來的基因治療載體。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細胞、長期穩定表達外源基因等優點,因此成為導入外源基因的有力工具。現在慢病毒係統已經被廣泛應用到各種細胞係的基因過表達、RNA幹擾、microRNA研究以及活體動物實驗中。
 
 
漢恒服務項目
 
漢恒生物科技(上海)有限公司提供慢病毒載體構建、RNAi(shRNA)、miRNA、過表達和幹擾慢病毒包裝以及基於慢病毒技術的穩定細胞係構建服務。詳情可查詢:病毒現貨庫
   
 
整體實驗流程
 
(一) 實驗流程(1、2、3為並列步驟)
 
1. 慢病毒過表達質粒載體的構建 設計上下遊特異性擴增引物,同時引入酶切位點,采用PCR技術(采用高保真KOD酶,3K內突變率為0%)從模板中(cDNA質粒或者文庫)調取目的基因CDS區(coding sequence)連入T載體。將CDS區從T載體上切下,裝入慢病毒過表達質粒載體。
 
2. 慢病毒幹擾質粒載體的構建 合成siRNA對應的DNA頸環結構,退火後連入慢病毒幹擾質粒載體。
 
3. miRNA載體構建從 Genomic 中調取基因相應的Mir 前體, 並在調取引物中引入酶切位點。
 
4. 慢病毒載體的包裝與濃縮純化 製備慢病毒穿梭質粒及其輔助包裝原件載體質粒(兩質粒包裝係統),三種質粒載體分別進行高純度無內毒素抽提,共轉染293T細胞,轉染後6 h 更換為完全培養基,培養48和72h後,分別收集富含慢病毒顆粒的細胞上清液,病毒上清液通過超離心濃縮病毒。
 
(二)流程圖
           
 
提供產品
產品名稱 病毒滴度 規格 贈送陰性對照病毒規格
過表達慢病毒 >10^8 PFU/ml 1ml 1ml(>10^8 PFU/ml
幹擾慢病毒 >10^8 PFU/ml 1ml 1ml(>10^8 PFU/ml)

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